SDS-PAGE 试剂准备

A. 1.5M Tris-HCl 缓冲液，pH 8.8 (100 毫升)

• 使用磁力搅拌器将18.15克Tris溶解在75毫升去离子水中。
• 使用5M HCl将pH调节至8.8。
• 用去离子水将总体积补足至100毫升。

B. 0.5M Tris-HCl 缓冲液，pH 6.8 (100 毫升)

• 使用磁力搅拌器将6.05克Tris溶解在75毫升去离子水中。
• 使用5M HCl将pH调节至6.8。
• 用去离子水将总体积补足至100毫升。

C. 10% (w/v) 十二烷基硫酸钠 (SDS) (10 毫升)

• 将1克SDS溶解在8毫升去离子水中。
• 用去离子水补足至10毫升。
• 室温下最多可储存6个月。如果在低温储存期间出现沉淀，则在 37°C 下孵育混合物，直到SDS重新溶解。

D. 10% (w/v) 过硫酸铵 (1 毫升)

• 在eppendorf管中将0.1克过硫酸铵溶解在1毫升去离子水中。

E. 30% (w/v) 丙烯酰胺/Bis (200 毫升)

• 称取58.4克丙烯酰胺和1.6克N,N'-亚甲基双丙烯酰胺。 注意！丙烯酰胺毒性极强。请佩戴手套和口罩。
• 将上述两种试剂加入烧杯中，并加入200毫升去离子水。
• 使用磁力搅拌棒和搅拌器溶解。
• 将丙烯酰胺/Bis溶液储存在 2-8°C 的避光容器中。

F. 0.5% (w/v) 溴酚蓝溶液 (20 毫升)

• 将0.1克溴酚蓝溶解在20毫升去离子水中。

G. 增溶缓冲液 5X

• 称取10克（8毫升）甘油至通用容器中。
• 加入4毫升去离子水、1.6毫升10% (w/v) SDS和1毫升0.5M Tris-HCl缓冲液（pH 6.8）。
• 在通风橱内向上清液中加入0.4毫升2-巯基乙醇。
• 最后，加入0.2毫升溴酚蓝溶液。

H. 电极（运行）缓冲液 5X (5 升)

• 在5升量筒中，将75克Tris、360克甘氨酸和25克SDS加入4000毫升去离子水中。
• 使用磁力搅拌器溶解。
• 溶解后，用去离子水补足至5升。这是5X浓缩缓冲液。
• 电泳前，通过将200毫升浓缩液与800毫升去离子水稀释来制备运行缓冲液。

I. 电极（运行）缓冲液 5X (1 升)

• 注意： 在1升量筒中，将15克Tris、72克甘氨酸和5克SDS加入1000毫升去离子水中，并用磁力搅拌器溶解。
• 溶解后，用去离子水补足至1升。这是5X浓缩缓冲液。
• 室温储存。最多可稳定6个月。
• 电泳前，通过将200毫升浓缩液与800毫升去离子水稀释来制备运行缓冲液。